氣相色譜方法開發(fā)的一般步驟

　　1、樣品來源及其預(yù)處理方法
 

　　GC直接分析的樣品必須是氣體或液體，固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，而且要保證樣品中不含GC不能分析的組份(如無機(jī)鹽)或可能會損壞色譜柱的組份。
 

　　這樣，我們在接到一個未知樣品時(shí)，就必須了解它的來源，估計(jì)可能含有的組分，以及樣品的沸點(diǎn)范圍。如能確定直接進(jìn)樣分析，只要找一種合適的溶劑，一般講，溶劑應(yīng)具有較低沸點(diǎn)，從而使其容易與樣品分離。盡可能避免用水，二氯甲烷和甲醇作溶劑，它們對延長色譜柱的使用壽命不利。如果用毛細(xì)管分析，應(yīng)注意樣品濃度不要太高，以免造成柱超載，通常樣品的濃度為mg/ml級或更低。
 

　　如果樣品中有不能用GC直接分析的組分，或樣品濃度太低，就必須進(jìn)行必要的預(yù)處理，包括采用一些預(yù)分離手段，如各種萃取技術(shù)，濃縮方法，提純方法等。
 

　　2、確定儀器配置
 

　　所謂儀器配置就是用于分析樣品的方法采用什么進(jìn)樣裝置，什么載氣，什么色譜柱及其什么檢測器。
 

　　3、確定安初始操作條件
 

　　初始分離條件，主要包括進(jìn)樣量，進(jìn)樣器溫度，檢測器溫度，色譜柱溫度和載氣流速度。
 

　　1)進(jìn)樣量要根據(jù)樣品濃度，色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。
 

　　2)進(jìn)樣口溫度主要有樣品的沸點(diǎn)范圍決定，還要考慮色譜柱的使用溫度。首先要保證待測樣品全部汽化，其次要保證汽化的樣品組分能夠全部流出色譜柱，而不會在柱中冷凝。
 

　　3)色譜柱溫度的確定主要由樣品的復(fù)雜程度和汽化溫度決定。
 

　　4)檢測器溫度是指檢測器加熱塊溫度而不是實(shí)際檢測點(diǎn)，如火焰的溫度。
 

　　檢測器溫度設(shè)置原則是保證流出色譜柱的組分不會冷凝，同是又滿足檢測器靈敏度的要求。大部分檢測器的靈敏度受溫度影響不大，故檢測器溫度可參照色譜柱的zui高溫度設(shè)定。
 

　　5)載氣流速的確定相對容易一些，開始可按照比*流速(氮?dú)饧s20cm/S、氦氣約25cm/S、氫氣約為30cm/S)高10%來設(shè)定，然后根據(jù)分離情況進(jìn)行調(diào)節(jié)，原則是既保證待測物的*分離，又要保證盡可能短的分析時(shí)間，用填充柱時(shí)載氣流速一般設(shè)為30ml/min。
 

　　當(dāng)儀器沒有配置電子氣路(EPC)控制時(shí)，必須通過皂膜流量計(jì)或測定時(shí)間的方法來測定載氣流速，通過調(diào)節(jié)柱前壓的方式來改變載氣流速，色譜柱越長，內(nèi)徑越小柱溫越高，需要柱前壓越高。當(dāng)所用檢測器需要燃燒氣和輔助氣時(shí)，還要設(shè)定這些氣體的流量。
 

　　4、分離條件優(yōu)化
 

　　分離條件的優(yōu)化是一個很大的題目，這里只從實(shí)用角度簡單介紹優(yōu)化方法。這里只強(qiáng)調(diào)操作條件柱溫和載汽流速的優(yōu)化。條件優(yōu)化的目的就是在zui短的分析時(shí)間內(nèi)達(dá)到符合要求的分離結(jié)果。
 

　　5、定性鑒定
 

　　所謂定性，就是確定色譜峰的歸屬，對于簡單樣品，可根據(jù)準(zhǔn)物質(zhì)對照用保留值來確定色譜圖上的峰哪個是要分析的峰。定性時(shí)必須注意，在同一色譜柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所以對未知物的定性僅僅用一個保留數(shù)據(jù)是不夠的，雙柱或多柱保留數(shù)值定性是GC中較為可靠的方法，因?yàn)椴煌衔镌诓煌V柱上具有相同保留值的幾率要小的多。
 

　　6、定量分析
 

　　在這一步驟中是要確定用什么定量方法來測定待測組分的含量。